第一步：预先打开培养箱开关，设定温度为20℃(要求培养箱的恒温变化幅度为±1℃)。

第二步：加热或冷却样品至实验温度（一般为20℃），温度波动范围在±2℃之内。

第三步：曝气1小时或搅拌半小时使水样的溶解氧达到饱和（在20℃左右环境下）。

第四步：每升水样添加1mL B1试剂、3mL B2试剂，如有需要可添加2mL硝化抑制剂。

第五步：根据量程用量筒准确量取经预处理PH在7.2左右的水样。

第六步：将水样通过漏斗转入培养瓶中。

第七步：将清洁的搅拌转子装入培养瓶中。

第八步：将清洁的密封杯装入培养瓶内。（为保证密封可以在密封杯上下两侧涂适量真空硅脂）。

第九步：通过漏斗向密封杯内装入3/4勺（约0.6g）CO2吸收剂。

第十步：拧紧与培养瓶编号对应的瓶盖，将培养瓶按顺序放在测定仪主机上。

第十一步：将测定仪主机小心缓慢移入培养箱内，将电源线连接，并打开开关进行参数设置。

第十二步：实验完成后应将培养瓶、密封杯及搅拌转子彻底清洗干净，待用。

注意：

⒈预先估计被测样品的BOD值，如无法估计，可借助化学需氧量（CODCr）推算。一般BOD量按化学需氧量（CODCr）的70%计算大致的浓度范围。根据水样个数及8个培养瓶，选择需准备平行样数量。水样须经过预处理其PH值应在7.2左右。

⒉如果发生CO2吸收剂进入样品的情况，应倒掉样品并重新准备新样品。注意每个瓶子和密封盖及管道是配套的，不能互换拧错瓶盖，否则数据将与瓶中水样不对应。

⒊培养瓶中转子如有转动不好的，轻轻摇晃瓶子使其转动即可，但切勿摇晃幅度过大使CO2吸收剂进入水样。

4.在正常测定时恒温等待时间不能低于1小时，也不能高于3小时，否则影响测量结果。环境温度接近20℃选择恒温1小时，与20℃温差较大时在范围内适当延长恒温等待时间。

5.数据处理，仪器根据设定的取样量可以直读浓度。用户只需将同一样品的平行样取平均值即为此水样的BOD值。

6.清洗培养瓶、密封杯及转子时最好选用机械方法去除污垢，有条件的可选用超声波清洗机清洗。